Translation of "Restriction digestion" in German
The
correct
orientation
of
the
bioS1
fragment
in
pHS1
was
determined
by
restriction
digestion
and
sequencing.
Die
richtige
Orientierung
des
bioS1-Fragments
in
pHS1
wurde
durch
Restriktionsverdau
und
Sequenzierung
bestimmt.
EuroPat v2
Correct
orientation
of
the
bioS2
fragment
in
pHS2
was
determined
by
restriction
digestion
and
sequencing.
Die
richtige
Orientierung
des
bioS2-Fragments
in
pHS2
wurde
durch
Restriktionsverdau
und
Sequenzierung
bestimmt.
EuroPat v2
Positive
clones
were
identified
and
sequenced
after
a
restriction
digestion
with
the
enzyme
Xho1.
Positive
Klone
wurden
nach
einem
Restriktionsverdau
mit
dem
Enzym
Xhol
identifiziert
und
sequenziert.
EuroPat v2
Positive
clones
were
identified
after
a
restriction
digestion
with
the
enzyme
EcoRI
and
several
clones
were
sequenced.
Positive
Klone
wurden
nach
einem
Restriktionsverdau
mit
dem
Enzym
EcoRI
identifiziert
und
mehrere
Klone
sequenziert.
EuroPat v2
Once
the
single
colonies
had
appeared,
they
were
tested
for
correctness
by
isolating
their
plasmids
and
subjecting
them
to
restriction
digestion.
Nach
dem
Erscheinen
der
Einzelkolonien
wurden
diese
durch
Plasmidisolierung
und
Restriktionsverdau
auf
ihre
Richtigkeit
hin
überprüft.
EuroPat v2
The
DNA
fragments
which
were
obtained
in
Example
1
by
means
of
PCR
and
subsequent
restriction
digestion
were
ligated
into
this
linker.
In
diesen
Linker
wurden
die
in
Beispiel
1
durch
PCR
und
anschließenden
Restriktionsverdau
gewonnenen
DNS-Fragmente
ligiert.
EuroPat v2
This
was
carried
out
by
restriction
digestion
with
Bam
HI
and
Sal
I
and
ligation
into
the
corresponding
pYT
vector
fragment.
Diese
erfolgte
durch
Restriktionsverdau
mit
Bam
HI
und
Sal
I
und
Ligation
in
das
korrespondierende
pYT-Vektorfragment.
EuroPat v2
5'TGTGACCTGCCTCAC
the
primer
bonded
to
the
single
strand
is
extended
with
klenow
fragment,
any
possible
3'
overhand
is
eliminated,
the
oligonucleotide
complex
##STR5##
is
ligated
on,
the
resulting
DNA
fragment,
after
restriction
endonuclease
digestion
with
HindIII
and
BglII,
is
inserted
into
the
HindIII/BglII
cutting
site
of
the
plasmid
pAH51
instead
of
the
longer
fragment
native
to
the
plasmid
and
the
resulting
plasmid
is
transformed
for
replication
in
E.
coli
HB
101
and
cultivated.
Verfahren
zur
Herstellung
des
Plasmides
pAH51/2,
dadurch
gekennzeichnet,
daß
das
Plasmid
pAH50
mit
PvuII
geschnitten
wird,
das
0,4
kb
lange
Fragment
in
Gegenwart
des
15-mer
Oligonukleotid-Primers
denaturiert,
der
an
den
Einzelstrang
gebundene
Primer
mit
Klenow-Fragment
verlängert,
ein
möglicher
3'-Überhang
entfernt,der
Oligonukleotidkomplex
anligiert
wird,
das
erhaltene
DNA-Fragment
nach
Restriktionsendonukleaseverdauung
mit
HindIII
und
BglII
in
die
HindIII/BglII-Schnittstelle
des
Plasmides
pAH51
anstelle
des
plasmideigenen,
längeren
Fragmentes
eingefügt
wird
und
das
so
erhaltene
Plasmid
zur
Replikation
in
E.coli
HB
101
transformiert
und
kultiviert
wird.
EuroPat v2
Process
for
preparing
the
plasmid
parpATER103,
characterised
in
that
a
0.47
kb
long
fragment
of
the
plasmid
parpER33
which
has
been
totally
cut
with
HindIII
and
partially
cut
with
EcoRI
is
inserted
by
ligase
reaction
into
the
plasmid
PAT153
which
has
been
linearised
by
restriction
endonuclease
digestion
with
EcoRI
and
HindIII,
and
the
resulting
plasmid
is
transformed
for
replication
in
E.
coli
HB
101
and
cultivated.
Verfahren
zur
Herstellung
des
Plasmides
parpATER103,
dadurch
gekennzeichnet,
daß
in
das
durch
Restriktionsendonukleaseverdauung
mit
EcoRI
und
HindIII
linearisierte
Plasmid
pAT153
ein
0,47
kb
langes
Fragment
des
mit
HindIII
vollständig,
mit
EcoRI
partiell
geschnittenen
Plasmides
parpER33
mittels
Ligasereaktion
eingefügt
wird
und
das
so
erhaltene
Plasmid
zur
Replikation
in
E.coli
HB
101
transformiert
und
kultiviert
wird.
EuroPat v2
Labeled
oligonucleotides
have
found
an
extremely
large
number
of
uses
in
genetic
engineering
because
they
are
easier
to
handle
than
the
DNA
probes
which
are
conventionally
used
as
hybridization
probes
and
are
prepared
from
native
gene
material
by
restriction
digestion.
Markierte
Oligonukleotide
haben
in
der
Gentechnologie
außerordentlich
viele
Anwendungen
gefunden,
da
ihre
Handhabung
leichter
ist
als
die
der
herkömmlich
als
Hybridisierungsproben
verwendeten
DNA-Sonden,
die
durch
Restriktionsverdau
aus
nativem
Genmaterial
hergestellt
werden.
EuroPat v2
Process
for
preparing
the
plasmid
pAH51/2,
characterized
in
that
the
plasmid
pAH50
is
cut
with
PvuII,
the
fragment
0.4
kb
long
is
denatured
in
the
presence
of
the
15-mer
oligonucleotide
primer
5'
TGTGACCTGCCTCAC
the
primer
bonded
to
the
single
strand
is
extended
with
klenow
fragment,
any
possible
3'
overhang
is
eliminated,
the
oligonucleotide
complex
##STR6##
is
ligated
on,
the
resulting
DNA
fragment,
after
restriction
endonuclease
digestion
with
HindIII
and
BglII,
is
inserted
into
the
HindIII/BglII
cutting
site
of
the
plasmid
pAH51
instead
of
the
longer
fragment
native
to
the
plasmid
and
the
resulting
plasmid
is
transformed
for
replication
in
E.
coli
HB
101
and
cultivated.
Verfahren
zur
Herstellung
des
Plasmides
pAH51/2,
dadurch
gekennzeichnet,
daß
das
Plasmid
pAH50
mit
PvuII
geschnitten
wird,
das
0,4
kb
lange
Fragment
in
Gegenwart
des
15-mer
Oligonukleotid-Primers
denaturiert,
der
an
den
Einzelstrang
gebundene
Primer
mit
Klenow-Fragment
verlängert,
ein
möglicher
3'-Überhang
entfernt,der
Oligonukleotidkomplex
anligiert
wird,
das
erhaltene
DNA-Fragment
nach
Restriktionsendonukleaseverdauung
mit
HindIII
und
BglII
in
die
HindIII/BglII-Schnittstelle
des
Plasmides
pAH51
anstelle
des
plasmideigenen,
längeren
Fragmentes
eingefügt
wird
und
das
so
erhaltene
Plasmid
zur
Replikation
in
E.coli
HB
101
transformiert
und
kultiviert
wird.
EuroPat v2
After
separation
of
the
smaller
restriction
fragments,
the
construct
is
ligated
to
short
hairpin-formed
self-hybridizing
oligodesoxynucleotides,
said
hairpin-formed
desoxynucleotides
providing
a
overhang
able
to
hybridize
to
the
overhang
resulting
from
the
restriction
enzyme
digestion
of
the
construct
(FIG.
Nach
erneutem
Abtrennen
der
kleineren
Restriktionsfragmente
wird
das
Konstrukt
mit
kurzen,
haarnadelförmig
selbsthybridisierenden
Oligodesoxynukleotiden,
welche
einen
auf
den
durch
Restriktionsverdau
entstandenen
Überhang
des
Konstruktes
passenden
Überhang
ihrer
Doppelstrangstruktur
aufweisen,
ligiert
(Fig.
EuroPat v2
The
plasmid
DNA
(pMOS-FDH-C23S)
was
isolated
from
the
recombinant
pMOS
blue
cells
after
multiplication
in
E.
coli
and
the
FDH-C23S-EcoRl/Pstl
fragment
(1.1
kb)
was
prepared
by
means
of
restriction
digestion.
Aus
den
rekombinanten
pMOS-Blue-Zellen
wurde
nach
Vermehrung
in
E.
coli
die
Plasmid-DNA
(pMOS-FDH-C23S)
isoliert
und
das
FDH-C23S-EcoR1/Pst1-Fragment
(1.1
kb)
mittels
Restriktionsverdau
präpariert.
EuroPat v2
Positive
clones
were
identified
after
a
restriction
digestion
with
the
enzymes
Xho1
and
BamHI
and
several
clones
were
sequenced.
Positive
Klone
wurden
nach
einem
Restriktionsverdau
mit
den
Enzymen
XhoI
und
BamHI
identifiziert
und
mehrere
Klone
sequenziert.
EuroPat v2
Subsequent
restriction
digestion
with
the
enzymes
AsnI
(Boehringer
Mannheim)
and
PacI
(New
England
Biolabs)
yielded
the
desired
DNA
fragment
after
the
enzymes
had
been
removed.
Ein
anschließender
Restriktionsverdau
mit
den
Enzymen
AsnI
(Boehringer
Mannheim)
und
PacI
(New
England
Biolabs)
führte
nach
einer
Enzymentfernung
zum
gewünschten
DNS-Fragment.
EuroPat v2
Experience
has
shown
that,
as
compared
to
cells
with
the
capability
of
unlimited
proliferation,
nuclear
chromosomal
DNA
of
normal
transient
proliferating
cells
has,
after
restriction
digestion
and
analysis
of
the
restriction
fragments
in
a
southern
blot,
another
pattern
of
hybridizing
restriction
fragments
when
hybridizing
a
DNA
sequence
in
accordance
with
the
invention.
Es
hat
sich
nämlich
gezeigt,
daß
nukläre,
chromosomale
DNS
von
normalen
transient
proliferierenden
Zellen
im
Vergleich
zu
Zellen
mit
der
Fähigkeit
zu
unbegrenzter
Proliferation
nach
Restriktionsverdau
und
Analyse
der
erhaltenen
Restriktionsfragmente
in
einem
Southern-Blot,
ein
anderes
Muster
an
hybridisierenden
Restriktionsfragmenten
bei
Hybridisierung
einer
erfindungsgemäßen
DNS-Sequenz
ergeben.
EuroPat v2
An
EcoRI
fragment
1761
bp
long
and
containing
the
second
half
of
the
panBC
cluster
was
now
cut
out
of
the
plasmid
pUR1
by
means
of
restriction
digestion.
Aus
dem
Plasmid
pUR1
wurde
nun
ein
1761
bp
großes,
die
zweite
Hälfte
des
panBC-Clusters
enthaltendes,
EcoRI
Fragment
mittels
Restriktionsverdau
ausgeschnitten.
EuroPat v2