Translation of "Restriction digest" in German
Correspondingly
positive
clones
are
identified
by
analytical
restriction
digest
and
sequencing.
Entsprechend
positive
Klone
werden
durch
analytischen
Restriktionsverdau
und
Sequenzierung
identifiziert.
EuroPat v2
Two
DNA
fragments
were
generated
by
the
restriction
digest.
Durch
den
Restriktionsverdau
wurden
zwei
DNA-Fragmente
erzeugt.
EuroPat v2
The
completeness
of
all
plasmids
described
above
was
tested
by
restriction
digest.
Die
Vollständigkeit
aller
oben
beschriebenen
Plasmide
wurde
durch
Restriktionsverdau
überprüft.
EuroPat v2
The
physical
map
of
the
viral
genome,
for
example
of
the
EHV-2
strain
Thein-400/3,
is
subsequently
constructed
by
means
of
methods
known
per
se,
for
example
DNA/DNA
hybridisation,
partial
restriction
with
restriction
endonucleases
or
double
restrictions
with
restriction
endonculeases
(double
digest),
preferably
using
the
viral
gene
bank,
and
DNA-DNA
hybridisation.
Anschließend
wird
die
physikalische
Karte
des
viralen
Genoms,
z.B.
des
EHV-2
Stammes
Thein-400/3,
anhand
an
sich
bekannter
Methoden,
z.B.
DNA/DNA-Hybridisierung,
partielle
Restriktion
mit
Restriktionsendonukleasen
oder
zweifachen
Restriktionen
mit
Restriktionsendonukleasen
(Double
Digest),
bevorzugt
unter
Anwendung
der
viralen
Genbank,
und
DNA-DNA-Hybridisierung
konstruiert.
EuroPat v2
Since
the
Not
cassette
isolated
from
pselP-gpt-L2/preS1
or
pselP-gpt-L2/preS1dMyr
can
ligate
with
the
NotI-cleaved
vector
arms
in
two
different
orientations,
a
diagnostic
restriction
endonuclease
digest
was
performed
using
the
enzymes
XbaI
and
SacI.
Da
die
Not-Kassette,
die
aus
pselP-gpt-L2/preS1
oder
pselP-gpt-L2/preS1dMyr
isoliert
wurde,
mit
den
mit
NotI
geschnittenen
Vektorarmen
in
zwei
verschiedenen
Orientierungen
ligiert
werden
kann,
wurde
ein
diagnostischer
Restriktionsendonucleaseverdau
unter
Verwendung
der
Enzyme
XbaI
und
SacI
durchgeführt.
EuroPat v2
The
ThLPAAT
cDNA
was
excised
from
the
vector
pGEM-T
by
a
restriction
digest
with
HindIII/BamHI,
cloned
into
the
HindIII/BamHI-cut
shuttle
vector
pYES2
(Invitrogen,
Carlsbad,
USA),
and
the
resulting
vector
pYES2-ThLPAAT
was
transformed
into
E.
coli
XL1
Blue.
Die
ThLPAAT-cDNA
wurde
über
Restriktionsverdau
mit
HindIII/BamHI
aus
dem
Vektor
pGEM-T
ausgeschnitten,
in
den
HindIII/BamHI
geschnittenen
shuttle-Vektor
pYES2
(Invitrogen,
Carlsbad,
USA)
kloniert
und
der
so
entstandene
Vektor
pYES2-ThLPAAT
in
E.
coli
XL1
blue
transformiert.
EuroPat v2
Correspondingly
positive
clones
which
contain
the
complete
codA-RNAi
cassette
(pBluKS-nitP-codAsense-STLS1-codAanti-35S-T)
are
identified
by
analytical
restriction
digest
and
sequencing.
Entsprechend
positive
Klone,
welche
die
vollständige
codA-RNAi
Kassette
enthalten
(pBluKS-nitP-codAsense-STLS1-codAanti-35S-T),
werden
durch
analytischen
Restriktionsverdau
und
Sequenzierung
identifiziert.
EuroPat v2
Then,
a
restriction
digest
was
carried
out
with
the
isolated
bands
using
the
enzymes
Xhol
and
Spel
(heavy
chains)
and
Sacl
and
Xbal
(light
chains),
the
fragments
obtained
were
cloned
into
the
plasmid
vector
Bluescript
KS
(Stratagene)
after
cleaving
this
vector
with
the
restriction
enzymes
Xhol
and
Spel
or
Sacl
and
Xbal.
Die
isolierten
Banden
wurden
anschließend
einem
Restriktionsverdau
unter
Einsatz
der
Enzyme
Xhol
und
Spel
(schwere
Ketten)
bzw.
Sacl
und
Xbal
(leichte
Ketten)
unterzogen
und
die
erhaltenenen
Fragmente
in
den
Plasmid-Vektor
Bluescript
KS
(Stratagene)
kloniert,
nachdem
dieser
zunächst
mit
den
Restriktionsenzymen
Xhol
und
Spel
bzw.
Sacl
und
Xbal
gespalten
worden
war.
EuroPat v2
The
constructs
obtained,
pVWEX1serB
(FIG.
2)
and
pVWEX2serC
(FIG.
3)
were
tested
by
restriction
digest.
Die
erhaltenen
Konstrukte
pVWEX1
serB
(Figur
2)
und
pVWEX2
serC
(Figur
3)
wurden
durch
Restriktion
getestet.
EuroPat v2
The
use
of
these
two
restriction
sites,
the
special
arrangement
of
which
led
to
two
non-compatible
overhanging
DNA-ends
during
the
restriction
digest,
enabled
a
particularly
efficient
ligation.
Die
Verwendung
dieser
beiden
Restriktionsschnittstellen,
die
durch
ihre
spezielle
Anordnung
beim
Restriktionsverdau
zu
zwei
nicht
kompatiblen
überhängenden
DNA-Enden
führten,
ermöglichte
eine
besonders
effiziente
Ligierung.
EuroPat v2
For
this
purpose,
plasmid
DNA
was
prepared
in
the
mini
scale
using
the
plasmid
isolation
kit
of
Quiagen
company
according
to
the
manufacturer's
instructions,
and
was
subjected
to
a
restriction
digest
with
the
DNA
endonucleases
NdeI
and
XhoI
(New
England
Biolabs)
for
which
the
recognition
sequences
had
been
introduced
into
the
PCR
product
by
the
flanking
primers.
Dazu
wurde
Plasmid-DNA
im
Mini-Maßstab
mit
Hilfe
des
Plasmid-Isolierungskits
der
Firma
Qiagen
nach
Angaben
des
Herstellers
präpariert
und
einem
Restriktionsverdau
mit
den
DNA-Endonukleasen
Nde
I
und
Xho
I
(New
England
Biolabs),
deren
Erkennungssequenzen
durch
die
flankierenden
Primer
in
das
PCR-Produkt
eingeführt
worden
waren,
unterworfen.
EuroPat v2
Gene
cassettes
having
the
correct
DNA
sequence
were
cut
from
the
cloning
vector
pCR®4Blunt-TOP®
by
preparative
NdeI/XhoI
restriction
digest
and
isolated
by
preparative
agarose
gel
electrophoresis.
Genkassetten
mit
korrekter
DNA-Sequenz
wurden
durch
präparativen
Nde
I/
Xho
I-Restriktionsverdau
aus
dem
Klonierungsvektor
pCR
®
4Blunt-TOPO
®
herausgeschnitten
und
durch
präparative
Agarose-Gelelektorphorese
isoliert.
EuroPat v2
Gene
cassettes
having
the
correct
DNA
sequence
were
cut
from
the
cloning
vector
pCR®4Blunt-TOPO®
by
preparative
NdeI/XhoI
restriction
digest
and
isolated
by
preparative
agarose
gel
electrophoresis.
Genkassetten
mit
korrekter
DNA-Sequenz
wurden
durch
präparativen
Nde
I/
Xho
I-Restriktionsverdau
aus
dem
Klonierungsvektor
pCR
®
4Blunt-TOPO
®
herausgeschnitten
und
durch
präparative
Agarose-Gelelektorphorese
isoliert.
EuroPat v2
The
coding
sequence
of
the
genes
was
then
cut
out
of
the
gene
synthesis
plasmid
according
to
a
conventional
practice
known
to
the
person
skilled
in
the
art
by
means
of
restriction
digest
using
the
restriction
endonucleases
BamHI
and
NcoI
(New
England
BioLabs
GmbH,
Frankfurt).
Anschließend
wurde
die
kodierende
Sequenz
der
Gene
nach
gängiger,
dem
Fachmann
bekannter
Praxis
mittels
Restriktionsverdau
mit
den
Restriktions-Endonucleasen
BamHI
und
Ncol
(New
England
BioLabs
GmbH,
Frankfurt)
aus
dem
Gensynthese-Plasmid
geschnitten.
EuroPat v2
Overhangs
resulting
from
the
restriction
endonuclease
digests
were
removed
using
T4
DNA
polymerase.
Überhänge,
die
aus
dem
Restriktionsendonucleaseverdau
resultierten,
wurden
unter
Verwendung
von
T4-DNA-Polymerase
entfernt.
EuroPat v2
5'TGTGACCTGCCTCAC
the
primer
bonded
to
the
single
strand
is
extended
with
klenow
fragment,
any
possible
3'
overhand
is
eliminated,
the
oligonucleotide
complex
##STR5##
is
ligated
on,
the
resulting
DNA
fragment,
after
restriction
endonuclease
digestion
with
HindIII
and
BglII,
is
inserted
into
the
HindIII/BglII
cutting
site
of
the
plasmid
pAH51
instead
of
the
longer
fragment
native
to
the
plasmid
and
the
resulting
plasmid
is
transformed
for
replication
in
E.
coli
HB
101
and
cultivated.
Verfahren
zur
Herstellung
des
Plasmides
pAH51/2,
dadurch
gekennzeichnet,
daß
das
Plasmid
pAH50
mit
PvuII
geschnitten
wird,
das
0,4
kb
lange
Fragment
in
Gegenwart
des
15-mer
Oligonukleotid-Primers
denaturiert,
der
an
den
Einzelstrang
gebundene
Primer
mit
Klenow-Fragment
verlängert,
ein
möglicher
3'-Überhang
entfernt,der
Oligonukleotidkomplex
anligiert
wird,
das
erhaltene
DNA-Fragment
nach
Restriktionsendonukleaseverdauung
mit
HindIII
und
BglII
in
die
HindIII/BglII-Schnittstelle
des
Plasmides
pAH51
anstelle
des
plasmideigenen,
längeren
Fragmentes
eingefügt
wird
und
das
so
erhaltene
Plasmid
zur
Replikation
in
E.coli
HB
101
transformiert
und
kultiviert
wird.
EuroPat v2
Process
for
preparing
the
plasmid
parpATER103,
characterised
in
that
a
0.47
kb
long
fragment
of
the
plasmid
parpER33
which
has
been
totally
cut
with
HindIII
and
partially
cut
with
EcoRI
is
inserted
by
ligase
reaction
into
the
plasmid
PAT153
which
has
been
linearised
by
restriction
endonuclease
digestion
with
EcoRI
and
HindIII,
and
the
resulting
plasmid
is
transformed
for
replication
in
E.
coli
HB
101
and
cultivated.
Verfahren
zur
Herstellung
des
Plasmides
parpATER103,
dadurch
gekennzeichnet,
daß
in
das
durch
Restriktionsendonukleaseverdauung
mit
EcoRI
und
HindIII
linearisierte
Plasmid
pAT153
ein
0,47
kb
langes
Fragment
des
mit
HindIII
vollständig,
mit
EcoRI
partiell
geschnittenen
Plasmides
parpER33
mittels
Ligasereaktion
eingefügt
wird
und
das
so
erhaltene
Plasmid
zur
Replikation
in
E.coli
HB
101
transformiert
und
kultiviert
wird.
EuroPat v2